がん免疫療法：固形腫瘍におけるヒトT細胞のin vivoゲノム規模CRISPRスクリーニング
Nature 658, 8135 doi: 10.1038/s41586-026-10906-9
ヒトT細胞での大規模なCRISPRスクリーニングは、細胞免疫療法を増強する遺伝的改変の特定に大きな可能性を秘めている。しかし、固形腫瘍におけるT細胞機能の多くの調節因子は、in vitroでは明らかにされていない。腫瘍を持つマウスでのin vivoスクリーニングは、より生理的であるが、腫瘍内T細胞の回収率が低いことが制約となっている。今回我々は、固形腫瘍からヒトT細胞を効率的に回収するin vivoモデルを開発し、少数のマウスでのゲノム規模CRISPRスクリーニングを可能にした。このモデルの腫瘍浸潤T細胞は、脾臓T細胞と比べて機能不全の特徴を示し、理想的なスクリーニング状況を作り出している。我々は、2つのゲノム規模CRISPRノックアウトスクリーニングを行い、腫瘍内T細胞の存在量やエフェクター機能の調節因子を特定した。存在量のスクリーニングから、P2RY8–Gα13 GPCRシグナル伝達軸がT細胞の腫瘍浸潤の負の調節因子であることが明らかになった。エフェクター機能スクリーニングから、GNASが腫瘍におけるT細胞機能不全の主要なドライバーであることが特定された。GNASの産物であるGαsは、異なる抑制性リガンドを感知する複数のGPCRの下流でシグナルが集約される点として機能する。GNASのノックアウトにより、T細胞は複数の抑制性の合図に抵抗性になり、さまざまな固形腫瘍モデルにわたり、キメラ抗原受容体（CAR）系およびT細胞受容体（TCR）系の有効性が有意に向上した。P2RY8とGNASを組み合わせてノックアウトした場合、腫瘍制御がさらに高まることから、相補的なin vivoスクリーニングは、組み合わせた編集により、治療効力を高める直交標的を特定できることが示された。この柔軟でスケーラブルなプラットフォームは、固形腫瘍に対するT細胞療法を改良する遺伝的戦略を体系的に発見するために適用できる。
