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生化学：RNAの標的化はCRISPR–Cas12a2の無差別なヌクレアーゼ活性の抑制を解く
Nature 613, 7944 doi: 10.1038/s41586-022-05560-w
Cas12a2はCRISPR関連ヌクレアーゼの1つで、相補的なRNA標的を認識するとRNAをガイドとして塩基配列非特異的に一本鎖RNA、一本鎖DNA、二本鎖DNAを分解し、最終的には不稔感染に至る。今回我々は、二成分、三成分、四成分複合体中のCas12a2の構造を調べ、完全な活性化経路を明らかにした。得られた構造から、Cas12a2はコグネイトRNA標的に結合するまでは自己阻害されているが、RNA標的の結合によって正電荷を帯びた大きな割れ目の中にあるRuvC活性部位が露出することが分かった。二本鎖DNAである基質は、二本鎖をゆがめて局所的に融解させることによって捕捉され、対になって「芳香族クランプ」として働く残基によって安定化される。このようなクランプ残基は二本鎖DNAの分解とin vivoでの免疫系機能に不可欠である。今回の研究により、集団免疫を獲得するための不稔感染を起こすこの機構の構造基盤が明らかになった。この機構をうまく使えば、さまざまな副次的基質を分解できる合理的な変異体を作り出せる可能性がある。
