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細胞:活性をもつステップIスプライソソームの単離とそのRNPコアの組成

Nature 452, 7189 doi: 10.1038/nature06842

スプライソソーム内で触媒活性をもつRNA構造体を形成するには、タンパク質の助けが必要である。しかし、スプライソソームの活性部位を確立し、維持するのに必要なタンパク質の数と性質はほとんどわかっていない。今回我々は、ヒトスプライソソームC複合体を親和性により精製し、それらが追加因子なしでエキソンの連結を触媒することを示す。触媒活性をもつ前ともった後のスプライソソームの組成の比較から、B複合体からC複合体への転移の間にタンパク質の顕著な交換が起こり、見かけ上Prp19-CDC5複合体タンパク質は安定化され、SF3a/bタンパク質は不安定化されていた。精製されたC複合体を破壊すると塩存在下で安定なリボ核タンパク質(RNP)コアが単離でき、それにはスプライシング中間体、U2・U5・U6の核内低分子RNA、U5とヒトPrp19-CDC5が大部分を占めるタンパク質、Prp19関連因子が含まれていた。我々のデータは、スプライソソームの触媒活性RNPドメインについての手がかりを与え、その触媒活性構造を維持するのに上述のタンパク質が果たしている重要な役割を示す。

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