幹細胞：ヒト卵母細胞は1型糖尿病成人患者の体細胞核を再プログラム化して二倍体の多能性幹細胞を生じる

体細胞核の卵母細胞への移植によって多能性幹細胞を作り出すことができ、こうした細胞は一貫して胚性幹細胞と同等で、自家細胞移植療法での使用が期待できる。基礎研究では、転写因子群によって体細胞から多能性幹細胞を誘導する方法が広く用いられているが、誘導多能性幹細胞と胚性幹細胞の間には多くの違いが報告されており、それらが臨床応用にも影響してくる可能性がある。疾患を持つヒト被検者の成体細胞から二倍体胚性幹細胞株を樹立できれば、治療に使えると考えられるため、我々は胚盤胞発生や幹細胞誘導の効率に影響を及ぼすパラメーターを体系的に検討した。本研究では、キナーゼ阻害剤および翻訳阻害剤の使用や、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤の存在下での細胞培養など、卵母細胞の活性化プロトコルの改良によって胚盤胞期への発生が促されることを示す。発生効率は卵母細胞のドナーによって異なり、卵母細胞の成熟に必要とされるホルモン刺激の日数と逆相関していたが、その一方で、性腺刺激ホルモンの1日当たりの量や、採取された第二減数分裂中期の卵母細胞の総数は、発生の結果に影響しなかった。細胞融合のために高濃度のセンダイウイルスを用いると、細胞内カルシウム濃度が上昇し、未成熟卵母細胞が活性化されるので、我々はカルシウムを含まない培地中で希釈したセンダイウイルスを用いた。この修正した核移植プロトコルの使用により、新生児の体細胞と、今回が初めてとなる1型糖尿病成人女性患者体細胞から、二倍体多能性幹細胞株が樹立された。

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