Research Abstract

卵細胞注入を介したTALENによるSryノックアウトマウスの産生

Production of Sry knockout mouse using TALEN via oocyte injection

2013年11月5日 Scientific Reports 3 : 3136 doi: 10.1038/srep03136

最近開発された転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ(TALEN)技術は、Y染色体上の遺伝子に対してさえ、ノックアウトマウスの作製を可能にした。本研究では、TALEN RNAの前核期卵へのマイクロインジェクションを用いて、Sry(Y染色体上の性決定遺伝子)のノックアウトマウスを作製した。予想されたように、このノックアウトマウスは、雌の外生殖器および内生殖器、雌レベルの血中テストステロン値および脳の性的二型核において雌型を示した。このノックアウトマウスは、性周期を示し、雌としての交尾行動を行ったが、不妊あるいは生殖能力が低下していた。組織学的解析から、このノックアウトマウスの卵巣では、卵母細胞の数の減少および黄体化未破裂卵胞を呈していたことから、排卵された卵母細胞の数の減少がこのノックアウトマウスの不妊および/あるいは生殖能力低下の理由である可能性が示唆された。

加藤 朋子1, 宮田 康平1,2, 園部 未来3, 山下 聡1, 玉野 萌恵1, 三浦 健人4, 金井 克晃4, 宮本 新吾2, 佐久間 哲史5, 山本 卓5, 乾 雅史1, 菊水 健史3, 浅原 弘嗣1,6,7 & 高田 修治1

  1. 独立行政法人国立成育医療研究センター研究所 システム発生・再生医学研究部
  2. 福岡大学 医学部 産婦人科学教室
  3. 麻布大学 獣医学部 動物応用科学科
  4. 東京大学大学院 農学生命科学研究科 獣医解剖学教室
  5. 広島大学大学院 理学研究科 数理分子生命理学専攻
  6. 東京医科歯科大学大学院 医歯学総合研究科 システム発生・再生医学研究部門
  7. 独立行政法人科学技術振興機構 CREST
Recently developed transcription activator-like effector nuclease (TALEN) technology has enabled the creation of knockout mice, even for genes on the Y chromosome. In this study, we generated a knockout mouse for Sry, a sex-determining gene on the Y chromosome, using microinjection of TALEN RNA into pronuclear stage oocytes. As expected, the knockout mouse had female external and internal genitalia, a female level of blood testosterone and a female sexually dimorphic nucleus in the brain. The knockout mouse exhibited an estrous cycle and performed copulatory behavior as females, although it was infertile or had reduced fertility. A histological analysis showed that the ovary of the knockout mouse displayed a reduced number of oocytes and luteinized unruptured follicles, implying that a reduced number of ovulated oocytes is a possible reason for infertility and/or reduced fertility in the KO mouse.

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