生物工学：ゲノム編集複合体のin vivo送達による常染色体優性遺伝性難聴の治療

難聴の全症例のおよそ半数は遺伝的要因によるものであるが、遺伝性難聴の治療選択肢は限られている。我々は、優性（顕性）の遺伝性難聴を標的とするゲノム編集手法を開発した。今回我々は、ヒト遺伝性難聴のマウスモデルにおいて、Cas9–ガイドRNA複合体の陽イオン性脂質を介したin vivo送達により、難聴を軽減できることを示す。Tmc1（transmembrane channel-like gene family 1）ベートーベン（Bth）マウスモデルにおいて、優性遺伝性の難聴関連対立遺伝子を優先的に破壊するゲノム編集複合体を設計し、in vitroと初代繊維芽細胞の両方で評価した。変異型Tmc1^Bth対立遺伝子は、野生型対立遺伝子と一塩基対だけが異なっている。Tmc1^Bth対立遺伝子を標的とするCas9–ガイドRNA–脂質複合体をTmc1^Bth/+新生仔マウスの蝸牛に注入すると、進行性難聴が大きく軽減された。この複合体を注入された耳では、注入されていない耳や関係のない遺伝子を標的とする対照複合体が注入された耳よりも、有毛細胞の生存率が高く、聴性脳幹反応の閾値が低かった。この複合体を注入されていないTmc1^Bth/+マウスと比べて、注入されたTmc1^Bth/+マウスでは、聴覚性驚愕反射の増強が観察された。これらの知見から、in vivoで標的遺伝子を破壊する複合体の、タンパク質–RNA複合体という形での送達は、あるタイプの常染色体優性遺伝性難聴の治療のための戦略になる可能性が示唆された。

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