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生物工学：線状のドナーDNAとのプライムアセンブリによってDNAへの大規模なゲノム挿入が可能になる
Nature 654, 8119 doi: 10.1038/s41586-026-10460-4
大きなDNA断片の標的部位への挿入は、ゲノム工学や遺伝子治療にとって有望な応用技術である。ツインプライム編集ガイドRNAによって比較的大きな断片の挿入が可能になったが、400塩基対より大きな断片の挿入効率は依然として低い。今回我々は、一対のガイドを使うプライム編集（ツインプライム編集）によって生成されるフラップとドナー断片の両端が重複するように設計された、大きなDNAドナー断片を挿入するためのプライムアセンブリ（PA）手法について報告する。このPAを使い、1個あるいは複数個の重複するDNA断片を挿入し、全体として0.1～11 kbのサイズの挿入を実現した。非相同末端連結の阻害剤は、挿入の効率と精度の両方を上昇させた。PAは容易に作れるDNA鋳型を用いており、外来のDNA依存性DNAポリメラーゼの同時送達の必要がなく、非周期細胞でも進行することから、カノニカルな相同性に基づく修復経路とは無関係なことが示唆された。この研究によって、PAが細胞内でギブソン様アセンブリを開始させ、DNA二本鎖切断やリコンビナーゼ、相同性に基づく修復を伴うことなく遺伝子挿入を行えることが実証された。
